Novaĵoj - Enkonduko de teknologio de eltiro de nuklea acido

ⅠNukleika acidoinkonduko

Nuklea acido estas dividita en deoksiribonukleika acido (DNA) kaj ribonukleika acido (RNA), inter kiuj RNA estas dividita en ribosoma RNA (rRNA), mesaĝa RNA (mRNA) kaj transiga RNA (tRNA) laŭ siaj malsamaj funkcioj.DNA estas ĉefe koncentrita en la nukleo, mitokondrioj kaj kloroformo, dum RNA estas plejparte distribuita en la citoplasmo.Kiel la materiala bazo de genesprimo, nuklea acida ekstraktado ludas ekstreme gravan rolon en molekula biologia esplorado kaj klinika molekula diagnozo.La koncentriĝo kaj pureco de nuklea acida eltiro rekte influos la postan PCR, sekvencadon, vektoran konstruon, enziman digeston kaj aliajn eksperimentojn.

Ⅱ Metodo de eltiro kaj purigado de nuklea acido

① Fenolo/kloroforma eltira metodo

Fenol/kloroform-ekstraktado estas klasika metodo por DNA-ekstraktado, kiu plejparte uzas du malsamajn organikajn solvilojn por trakti la provaĵojn, dissolvante DNA-bazitan nuklean acidon en la akvofazo, lipidojn en la organika fazo, kaj proteinojn inter la du fazoj.Ĉi tiu metodo havas la avantaĝojn de malalta kosto, alta pureco kaj bona efiko.La malavantaĝoj estas komplika operacio kaj longa tempo.

② Trizol-metodo

Trizol-metodo estas klasika metodo por RNA-ekstraktado.La metodo Trizol estas dividita en akvan fazon kaj organikan fazon post centrifugado kun kloroformo, en kiu la RNA estas solvita en la akva fazo, la akva fazo estas translokigita al nova EP-tubo, precipitaĵo ricevas post aldono de izopropanolo, kaj tiam etanola purigo.Ĉi tiu metodo taŭgas por eltiro de RNA el bestaj histoj, ĉeloj kaj bakterioj.

③ Centrifuga kolumna puriga metodo

Centrifuga kolumna purigada metodo povas adsorbi DNA specife per specialaj materialoj de adsorbado de silicio-matrico, dum RNA kaj proteino povas pasi glate, kaj tiam uzi altan salon malaltan PH por kombini nuklean acidon, malaltan salo altan PH-valoran elucion por apartigi kaj purigi nuklean acidon.La avantaĝoj estas alta puriga koncentriĝo, alta stabileco, neniu bezono de organika solvilo kaj malalta kosto.La malavantaĝo estas, ke ĝi devas esti centrifugata paŝon post paŝo, pli da operaciaj paŝoj.

④ Metodo de magnetaj bidoj

La metodo de magnetbidoj estas disigi la ĉelan histan specimenon tra la lisato, liberigi la nuklean acidon en la specimeno, kaj tiam la nukleaj acidaj molekuloj estas specife adsorbitaj sur la surfaco de la magneta bido, dum malpuraĵoj kiel proteinoj kaj sukeroj restas enen. la likvaĵo.Per la paŝoj de ĉela histo-disigo, magneta bido-ligado kun nuklea acido, nukleacida lavado, nukleacida eluo ktp., pura nuklea acido estas finfine akirita.La avantaĝoj estas simpla funkciado kaj mallonga tempo-uzo, sen la bezono de paŝa centrifugado.Ĝi havas malaltajn teknikajn postulojn kaj povas realigi aŭtomatan kaj amasan operacion.La specifa kombinaĵo de magneta bido kaj nuklea acido faras la ĉerpitan nuklean acidon kun alta koncentriĝo kaj pureco.La malavantaĝo estas, ke la nuna merkata prezo estas relative multekosta.

⑤ Aliaj metodoj

Krom ĉi-supraj kvar metodoj, ekzistas bolanta krakado, koncentrita salo-metodo, anjona lesiva metodo, ultrasona metodo kaj enzimeca metodo, ktp.

Ⅲ Tipo de eltiro de nuklea acido

Foregene havas la plej elstaran Rektan PCR-platformon de la mondo, duoblan kolumnan RNA-Izolan platformon (DNA-nur + RNA nur).La ĉefaj produktoj inkluzivas DNA/RNA-izolaj ilaroj, PCR kaj Rektaj PCR-reakciiloj molekulaj laboratorioreakciiloj serioj.

① Tuta RNA-eltiro

Tuta RNA-ekstraktado specimenoj inkluzivas sangon, ĉelojn, bestajn histojn, plantojn, virusojn, ktp. Alta pureco kaj alta koncentriĝo de totala RNA povas esti akirita per totala RNA-ekstraktado, kiu povas esti uzata en RT-PCR, pecetanalizo, en vitrotradukado, molekula klonado, Dot Blot kaj aliaj eksperimentoj.

Antaŭgeno rilataRNA-Izolaj Ilaroj

Besta Totala RNA-Izola Ilaro--Rapide kaj efike ĉerpas altpuran kaj altkvalitan totalan RNA el diversaj bestaj histoj.

Ĉela Totala RNA-Izola Ilaro--Tre purigita kaj altkvalita totala RNA povas esti akirita de diversaj kulturitaj ĉeloj en 11 minutoj.

Plant Totala RNA-Izola Ilaro--Rapide ĉerpi altkvalitan totalan RNA el plantprovaĵoj kun malalta polisakarido kaj polifenola enhavo.

Viral RNA-Izola Ilaro--Rapide izolu kaj purigu virusan RNA el specimenoj kiel plasmo, serumo, senĉelaj korpaj fluidoj kaj ĉelkulturaj supernajloj.

② Genomic DNA-eltiro

Genomic DNA-ekstraktado-provaĵoj inkluzivas grundon, fekon, sangon, ĉelojn, bestajn histojn, plantojn, virusojn, ktp. Genomic DNA-ekstraktadon povas esti uzata en enzimdigestado, DNA-biblioteka konstruo, PCR, antikorpa preparado, analizo de hibridiĝo de Western blot, gena peceto, alta. -traigo-sekvencado kaj aliaj eksperimentoj.

Antaŭgeno rilataDNA-Izolaj Ilaro

Besta histo DNA-Izola Ilaro--Rapida eltiro kaj purigo de genoma DNA el multoblaj fontoj, kiel bestaj histoj, ĉeloj, ktp.

Blood DNA Midi Kit (1-5 ml)--Rapide purigu altkvalitan genoman DNA el antikoagulita sango (1-5 ml).

Buccal Swab/FTA-Karto DNA-Izola Ilaro--Rapide purigu altkvalitan genoman DNA el buŝaj ŝabloj/FTA-Kartaj specimenoj.

Plant DNA-Izola Ilaro--Rapide purigu kaj akiru altkvalitan genoman DNA el plantprovaĵoj (inkluzive de polisakaridoj kaj polifenolaj plantprovaĵoj)

③ Plasmida eltiro

Plasmido estas speco de cirkla malgranda molekulo DNA en ĉeloj, kiu estas ofta portanto por DNA-rekombinigo.La metodo de plasmid-ekstraktado devas forigi RNA, apartigi plasmidon de bakteria genoma DNA, kaj forigi proteinon kaj aliajn malpuraĵojn por akiri relative puran plasmidon.

Ĝenerala Plasmid Mini Kit--Rapide purigu altkvalitan plasmidan DNA de transformitaj bakterioj por rutinaj molekula biologiaj eksperimentoj kiel transformo kaj enzimdigestado.

④ Aliaj eltipaj specoj, miRNA-ekstraktado ktp.